Western Blot-抗體檢測(cè)技術(shù)服務(wù)

一、服務(wù)內(nèi)容

1、從動(dòng)物細(xì)胞、人或動(dòng)物組織、細(xì)菌、植物等樣品中提取蛋白，重組蛋白、血清、培養(yǎng)上清等樣品

2、對(duì)樣品中蛋白進(jìn)行半定量分析

3、Western blot檢測(cè)

（1） 電泳：聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）分離蛋白樣品

（2） 濕法轉(zhuǎn)?。˙LOTING：Tank Transfer）

（3） 雜交：用抗體鑒定膜上的特定蛋白（INCUBATION: Antibody）

（4） 化學(xué)發(fā)光檢測(cè)（ECL），膠片曝光，TotalLab Quant軟件讀取IOD值（可選）

4、預(yù)實(shí)驗(yàn)及正式實(shí)驗(yàn)服務(wù)：幫助客戶設(shè)計(jì)樣品上樣順序以符合論文發(fā)表要求

5、免費(fèi)進(jìn)行蛋白內(nèi)參檢測(cè)（所有內(nèi)參抗體均免費(fèi)提供）

二、樣品要求

1、細(xì)胞＞1×107；組織＞30mg；細(xì)菌濕重＞1mg；植物＞100mg；血清＞50ul；等

2、樣品蛋白濃度＞1mg/ml，蛋白量＞200ug/樣品

四、客戶提供材料

1、新鮮或正確保存的樣品（按照我們的要求提供）

2、目的蛋白一抗：我們可以給客戶免費(fèi)提供抗體查找服務(wù)

3、陽(yáng)性對(duì)照樣品（盡量提供）

4、相關(guān)文獻(xiàn)（可選）

五、提交給客戶結(jié)果

1、預(yù)實(shí)驗(yàn)曝光結(jié)果（膠片及掃描圖），預(yù)實(shí)驗(yàn)采取3個(gè)一抗稀釋度

2、正式實(shí)驗(yàn)曝光結(jié)果（膠片及掃描圖）

3、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告

4、IOD值分析報(bào)告（可選）

六、服務(wù)項(xiàng)目說(shuō)明

客戶要求加可曝光marker的，需事先說(shuō)明，并按照可曝光項(xiàng)目收費(fèi)

1、提供的蛋白量與目的待檢測(cè)的蛋白數(shù)量有關(guān)，蛋白數(shù)量增加相應(yīng)的樣品量也要增加

2、胞漿、胞核蛋白抽提樣品來(lái)源為：哺乳動(dòng)物細(xì)胞、動(dòng)物組織。如果1個(gè)樣品分別提取胞漿、胞核蛋白后，蛋白定量時(shí)以2個(gè)樣品計(jì)算

3、每張膜樣品數(shù)量為1-8個(gè)，不足8個(gè)以8個(gè)收取。9-16個(gè)樣品為2張膜，17-24個(gè)樣品為3張膜；以此類推

舉例：7個(gè)樣品，1個(gè)目的蛋白，算1張膜；有9個(gè)樣品，1個(gè)目的蛋白，算2張膜

      7個(gè)樣品，2個(gè)目的蛋白，算2張膜，有9個(gè)樣品，2個(gè)目的蛋白，算4張膜

以上為一般算法。如果客戶樣品數(shù)量需要按照組別等來(lái)進(jìn)行上樣時(shí)需要重新確定每張膜的上樣量及膜的張數(shù)

4、選擇部分樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，參考目的蛋白一抗說(shuō)明書(shū)進(jìn)行3個(gè)稀釋度的預(yù)實(shí)驗(yàn)

5、向客戶反饋預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，等待客戶確認(rèn)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果后確定是否進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)

6、請(qǐng)您提供質(zhì)量保證的一抗（或委托我公司代購(gòu)）。抗體的使用量通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)后進(jìn)行確認(rèn)，一般不回收使用一抗

7、如果需要對(duì)膜上目的蛋白進(jìn)行抗體剝離（洗脫或者 stripping）的，請(qǐng)?zhí)崆罢f(shuō)明

8、建議提供目的蛋白陽(yáng)性表達(dá)樣品（純蛋白、有陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞或組織、商品化的陽(yáng)性對(duì)照產(chǎn)品等）作為陽(yáng)性對(duì)照

9、免費(fèi)內(nèi)參檢測(cè)為：beta-actin，beta-tubulin，GAPDH，Histone H3， Lamin B1等

10、如需進(jìn)一步數(shù)據(jù)分析：TotalLab Quant專業(yè)軟件讀取IOD值、條帶的Normalization處理、以及發(fā)表論文時(shí)所用條帶的處理，請(qǐng)另詢價(jià)

11、對(duì)條帶結(jié)果有特殊要求，請(qǐng)另詢價(jià)

12、雙方簽訂合同后，收取70%首付后啟動(dòng)預(yù)實(shí)驗(yàn)

13、WB特殊要求請(qǐng)咨詢